玉簪ACC氧化酶基因RNA干涉表达载体的构建

›› 2008, Vol. 20 ›› Issue (1): 0-23.

• 论文 •

玉簪ACC氧化酶基因RNA干涉表达载体的构建

徐强；王长春；胡海涛；王芳；杨玲

宁波市农业科学研究院,浙江宁波,315040;浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华,321004

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-01-25 发布日期:2008-01-25

Construction of RNAi expression vector targeting ACO gene in Hosta plantaginea

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-01-25 Published:2008-01-25

摘要/Abstract

摘要： 以玉簪花瓣为材料,用改良的硼酸盐法提取总RNA.根据已报道的ACC氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid oxidase,ACO)基因的保守序列,设计带限制性内切酶位点的特异性引物,用RT-PCR技术获得约330 bp的片段.序列分析表明,该片段与GenBank已知ACO基因序列高度同源.将此片段以正向和反向插人到中间载体pBSin内含子两端.利用pCAMBIA35S-1301作为桥梁载体,构建RNA干涉表达载体pCAMBI-A-ACO.采用冻融法将pCAMBIA-ACO导人根癌农杆菌GV3101中,得到完整的Ti质粒表达载体系统.

关键词: 玉簪, ACC氧化酶, RNA干涉, 表达载体

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玉簪ACC氧化酶基因RNA干涉表达载体的构建

Construction of RNAi expression vector targeting ACO gene in Hosta plantaginea

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