摘要: 研究旨在分析谷氨酰胺(Gln)对基础状态乳腺上皮细胞生长、增殖及热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。取对数生长期的奶牛乳腺上皮细胞用于试验,细胞在含有不同浓度(0,05,10,20,40,80和160 mmol·L-1)Gln的DMEM培养液中培养24 h,收取细胞及培养液;细胞在含8 mmol·L-1 Gln的DMEM培养液中培养不同时间(0,3,6,12,24,48,72 h)后,收取细胞及细胞培养液。采用MTT法检测细胞存活率,比色法检测LDH活性,SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测细胞内热休克转录因子1(HSF\|1)和HSP70的表达水平。结果显示:Gln能促进奶牛乳腺上皮细胞生长增殖,Gln浓度为20 mmol·L-1时细胞存活率最高,40~80 mmol·L-1时仍维持较高水平;细胞内HSP70与HSF\|1的表达趋势一致,80 mmol·L-1的Gln诱导24 h,二者表达量均达峰值,分别为细胞活性最佳剂量20 mmol·L-1表达量的849倍(P<001)和590倍(P<001),表明Gln能促进奶牛乳腺上皮细胞的生长、增殖,并通过启动HSF\|1 mRNA的转录活性诱导基础状态乳腺上皮细胞高表达HSP70 mRNA。