›› 2008, Vol. 20 ›› Issue (2): 0-91.

• 论文 •    

萧山鸡γ-干扰素(IFN-γ)成熟蛋白基因的克隆、原核表达及真核表达载体的构建

徐根亮;由振强;余夏萌;吕冬梅;于涟   

  1. 浙江省医学科学院,浙江,杭州,310013;浙江大学动物预防医学研究所,浙江省动物预防医学重点实验室,浙江,杭州,310029
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-03-25 发布日期:2008-03-25

Cloning, prokaryotic expression and the construction of eukaryotic vector of the gene encoding mature interferon-gamma protein from Xiao-shan chicken

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-03-25 Published:2008-03-25

摘要: 以有丝分裂原ConA诱导鸡脾脏淋巴细胞,用Trizol试剂提取细胞总RNA,利用RT-PCR技术获得了萧山鸡γ-干扰素成熟蛋白基因495 bp的序列,GenBank登录号为DQ470471.序列分析表明,与已经发表的鸡γ-干扰素成熟蛋白基因序列的核苷酸同源性为95~99.9.将该cDNA序列构建得到鸡γ-干扰素的原核表达载体pET30a-ChIFN-γ,成功在大肠杆菌中表达了分子量20.88 kD的目的蛋白,与预期分子量一致;并构建得到了鸡γ-干扰素的pCI真核表达载体(pCI-ChIFN-γ).

关键词: 萧山鸡γ-干扰素, RT-PCR, 原核表达, 真核表达载体