摘要: 为了能够准确测定猪血清中猪α\|干扰素(PoIFN\|α)含量及猪α\|干扰素制品的浓度,本研究以制备并经过亲和层析提纯的兔抗猪α\|干扰素IgG多克隆抗体为包被抗体,以制备的鼠抗猪α\|干扰素单克隆纯化抗体作为二抗,建立了测定猪α\|干扰素浓度的双抗体夹心ELISA法(DAS\|ELISA)。通过条件优化,最佳兔抗猪α\|干扰素IgG多克隆纯化抗体包被浓度为125 μg·mL-1,最佳鼠抗猪α\|干扰素单克隆纯化抗体作用浓度为625 μg·mL-1,利用本实验室制备的已知浓度猪α\|干扰素标准蛋白建立标准曲线,确定该方法检测猪α\|干扰素浓度范围为00781~250 μg·mL-1。与Lowry法、冻干称量法测定猪α\|干扰素浓度相比较,3种方法检测结果无显著差异,但所建立的双抗体夹心ELISA法能够检测血清中猪α\|干扰素浓度,且方法简便。