鹅副粘病毒HN蛋白的原核表达与免疫学鉴定

›› 2012, Vol. 24 ›› Issue (2): 0-220.

• 动物科学 •

鹅副粘病毒HN蛋白的原核表达与免疫学鉴定

李彤彤1,2,李银1,*,黄欣梅1,赵冬敏1,刘宇卓1,张敬峰1,刘飞1,2,李祥瑞2

1江苏省农业科学院兽医研究所，农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室，国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014；2南京农业大学动物医学院,江苏南京210095

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2012-03-25 发布日期:2012-03-25

Prokaryotic expression and immunologic identification of hemagglutininneuraminidase gene of Goose paramyxovirus E03 strain

LI Tong-tong;;LI Yin;*;HUANG Xin-mei;ZHAO Dong-min;LIU Yu-zhuo;ZHANG Jing-feng;LIU Fei;LI Xiang-rui

1Institute of Veterinary Medicine, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences/ Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology, Ministry of Agriculture/ National Center for Engineering Research of Veterinary Bioproducts, Nanjing 210014 China; 2College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2012-03-25 Published:2012-03-25

摘要/Abstract

摘要：

以GenBank登录的鹅源副粘病毒GPMV ZJI株基因组全序列为模板,在HN基因开放阅读框上下游设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增得到HN基因,将目的基因克隆至pET32a表达载体上,转化至BL21中,通过SDS-PAGE和Western-blot鉴定目的蛋白的表达。由结果可知,通过RT-PCR法扩增出HN基因,大小与预期一致。SDS-PAGE和Western-blot均得到预期条带,说明pET32a表达载体在BL21中成功表达了HN蛋白,为后续相关免疫学研究奠定基础。

关键词: 鹅副粘病毒, HN基因, 原核表达

Abstract: The HN gene of goose paramyxovirus (GPMV) E03 strain was amplified by RT-PCR with the primers designed on the basis of HN gene sequence of GPMV ZJI strain,and then was inserted into the prokaryotic vector pET32a for the construction of prokaryotic expression vector, named pET-HN. Then we transformed pET-HN into Escherichia coli BL21,and identified by SDS-PAGE and Western blot. The target gene was amplified by RT-PCR. SDS-PAGE and Western blot showed the target strap of fusion protein. It was apparent that the HN gene was expressed in E.coli at high level; meanwhile, the prokaryotic expression products of this gene would be a good foundation for immunologic identification about GPMV．

Key words: Goose paramyxovirus, HN gene, prokaryotic expression

李彤彤;李银;*;黄欣梅;赵冬敏;刘宇卓;张敬峰;刘飞;李祥瑞 . 鹅副粘病毒HN蛋白的原核表达与免疫学鉴定[J]. , 2012, 24(2): 0-220.

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鹅副粘病毒HN蛋白的原核表达与免疫学鉴定

Prokaryotic expression and immunologic identification of hemagglutininneuraminidase gene of Goose paramyxovirus E03 strain

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