›› 2011, Vol. 23 ›› Issue (6): 0-1089.
• 动物科学 •
暗纹东方鲀SRAP-PCR体系的建立与优化
程长洪1,张敏莹2,刘凯2,徐东坡2,段金荣2,周彦锋2,施炜纲2,*
- 1南京农业大学 无锡渔业学院,江苏 无锡214081；2农业部长江下游渔业资源环境科学观测实验站,中国水产科学研究院 内陆渔业生态环境和资源重点开放实验室,中国水产科学研究院 淡水渔业研究中心,江苏 无锡 214081
Establishment and optimization of SRAP-PCR amplification system in Takifugu obscurus
CHENG Chanhong;ZHANG Minying;LIU Kai;XU Dongpo;DUAN Jinrong;ZHOU Yanfeng;SHI Weigang;*
- 1Wuxi Fisheries College of Nanjing Agricultural University,Wuxi 214081, China；2Key Field Station of Observation and Research for Fishery Resources and Environment of the Lower Reaches of Yangtze River, Ministry of Agriculture, Key Laboratory of Ecological Environment and Resources of Inland Fisheries, Freshwater Fisheries Research Center, CAFS, Wuxi 214081, China
摘要：
以暗纹东方鲀基因组DNA为材料,利用正交设计L16(45)对影响暗纹东方鲀SRAP-PCR反应的5个因素(Mg2+、Taq酶、dNTPs、模板DNA、引物)在4个水平上进行正交组合,确立了暗纹东方鲀SRAP反应最佳体系为：20 μL的PCR体系中含有 Mg2+1.5 mmol ·L -1、Taq酶0.5 U、模板DNA 75 ng、dNTPs 0.15 mmol·L -1、引物0.2 μmol· L -1。利用30个暗纹东方鲀样本对该体系进行验证,结果表明该体系稳定可靠。
