›› 2005, Vol. 17 ›› Issue (3): 0-119.

• 论文 •    

绍兴鸭α-干扰素基因克隆、表达及活性测定

叶伟成;张存;王一成;刘蔓雯;徐丽华;袁秀芳;张燕   

  1. 浙江省农业科学院,畜牧兽医研究所,浙江,杭州,310021
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-05-25 发布日期:2005-05-25

Cloning,expression, and activity determination of Shaoxing duck IFN-α gene

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2005-05-25 Published:2005-05-25

摘要: 采用PCR法从绍兴鸭的肝组织基因组DNA中扩增出α-干扰素基因,插入pUC18载体,进行序列测定及分析;将成熟α-干扰素基因亚克隆到表达载体pET-28α(+)中,并转化入大肠杆菌BL21进行表达;表达产物经复性后,进行抗病毒活性的测定.测序结果表明,该基因(sxDuIFN-α)由576个核苷酸组成,共编码191个氨基酸.该基因与GenBank公布的鸭α-干扰素基因(X84764, AB128861)的核苷酸序列同源性分别为99.3和99.1,氨基酸序列同源性均为97.9.表达载体经IPTG诱导表达出相对分子量为20.7 kD的DuIFN-α.该产物经细胞病变抑制法测定,显示出具有明显的抗猪水泡性口炎病毒(VSV)及鸭瘟弱毒疫苗毒的活性.

关键词: 绍兴鸭, α-干扰素, 基因克隆, 原核表达