浙江农业学报 ›› 2024, Vol. 36 ›› Issue (12): 2763-2773.DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.20240045
王士臻1(), 黄俊2, 李明江1, 黄英杰1, 张娟1,*(
)
收稿日期:
2024-01-08
出版日期:
2024-12-25
发布日期:
2024-12-27
作者简介:
王士臻(1987—),女,山西太原人,博士,助理研究员,主要研究植物与病原菌互作。E-mail:wsz_1231@outlook.com
通讯作者:
*张娟,E-mail:juanjuan0031@aliyun.com
基金资助:
WANG Shizhen1(), HUANG Jun2, LI Mingjiang1, HUANG Yingjie1, ZHANG Juan1,*(
)
Received:
2024-01-08
Online:
2024-12-25
Published:
2024-12-27
摘要:
近年来,随着桂树种植范围的推广且种植品种单一,桂花叶斑病的发生日趋严重,为明确杭州市内引起该病害发生的病原菌种类及其生物学特性,本研究首先通过发病部位组织分离培养获得其致病菌株一株,并通过ITS序列分析鉴定病原菌为葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea。其次,进一步探究了温度、pH值和培养基等不同环境条件对B. dothidea生长的影响,最终明确其适宜生长温度范围为23~28 ℃,最适生长pH值为5,最适生长培养基为燕麦培养基(OMA),不同碳、氮源对其生长影响不显著。同时通过不同温度梯度明确其致死温度及其致病能力,结果表明,其致死温度为55 ℃、20 min,致病能力随温度的升高明显增强。最后,通过药剂抑菌实验,完成5种药剂抑菌能力评价,其中抑菌最显著的是稀释10 000倍的20%丙环唑微乳剂,抑菌率超过90%。
中图分类号:
王士臻, 黄俊, 李明江, 黄英杰, 张娟. 浙江省桂花叶斑病的病原鉴定及生物学特性等相关研究[J]. 浙江农业学报, 2024, 36(12): 2763-2773.
WANG Shizhen, HUANG Jun, LI Mingjiang, HUANG Yingjie, ZHANG Juan. Identification and biological characteristics of phytopathogen in Osmanthus fragrans in Zhejiang Province of China[J]. Acta Agriculturae Zhejiangensis, 2024, 36(12): 2763-2773.
编号 No. | 供试药剂 Fungicide | 母液倍数 Mother solution multiple | 处理剂量(倍数) Diluted multiple | 生产厂家 Manufacturer |
---|---|---|---|---|
Ⅰ | 20%丙环唑微乳剂 20% Propiconazole ME | 50× | 10 000、15 000、 20 000、25 000、 30 000、50 000 | 河北中保绿农作物科技有限公司 Hebei Zhongbao Green Crop Technology Co., Ltd. |
Ⅱ | 咯菌腈25 g·L悬浮种衣剂 25g·L Fludioxonil FS | 50× | 5 000、7 500、11 250、 16 875、25 312.5、 30 000 | 乳山韩威生物科技有限公司 Rushan Hanwei Biotech Co.,Ltd. |
Ⅲ | 3%中生菌素可湿性粉剂 3% Zhongshengmycin WP | 50× | 5 000、7 500、11 250、 16 875、25 312.5、 30 000 | 河北中保绿农作物科技有限公司 Hebei Zhongbao Green Crop Technology Co., Ltd. |
Ⅳ | 10%苯醚甲环唑水分散粒剂 10% Difenoconazole WG | 50× | 5 000、7 500、11 250、 16 875、25 312.5、 30 000 | 先正达南通作物保护有限公司 Syngenta Nantong Crop Protection Co.,Ltd. |
Ⅴ | 50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂 50% Prochloraz-manganese chloride complex WP | 50× | 5 000、7 500、11 250、 16 875、25 312.5、 30 000 | 苏州富美实植物保护剂有限公司 FMC (Suzhou)Crop Care Co.,Ltd. |
表1 供试药剂及使用浓度
Table 1 Information of experimental fungicide
编号 No. | 供试药剂 Fungicide | 母液倍数 Mother solution multiple | 处理剂量(倍数) Diluted multiple | 生产厂家 Manufacturer |
---|---|---|---|---|
Ⅰ | 20%丙环唑微乳剂 20% Propiconazole ME | 50× | 10 000、15 000、 20 000、25 000、 30 000、50 000 | 河北中保绿农作物科技有限公司 Hebei Zhongbao Green Crop Technology Co., Ltd. |
Ⅱ | 咯菌腈25 g·L悬浮种衣剂 25g·L Fludioxonil FS | 50× | 5 000、7 500、11 250、 16 875、25 312.5、 30 000 | 乳山韩威生物科技有限公司 Rushan Hanwei Biotech Co.,Ltd. |
Ⅲ | 3%中生菌素可湿性粉剂 3% Zhongshengmycin WP | 50× | 5 000、7 500、11 250、 16 875、25 312.5、 30 000 | 河北中保绿农作物科技有限公司 Hebei Zhongbao Green Crop Technology Co., Ltd. |
Ⅳ | 10%苯醚甲环唑水分散粒剂 10% Difenoconazole WG | 50× | 5 000、7 500、11 250、 16 875、25 312.5、 30 000 | 先正达南通作物保护有限公司 Syngenta Nantong Crop Protection Co.,Ltd. |
Ⅴ | 50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂 50% Prochloraz-manganese chloride complex WP | 50× | 5 000、7 500、11 250、 16 875、25 312.5、 30 000 | 苏州富美实植物保护剂有限公司 FMC (Suzhou)Crop Care Co.,Ltd. |
图3 基于菌株Bo1 rDNA-ITS序列的PCR电泳图(左)及系统发育树(右) rDNA-ITS of Bo1 by PCR using primers ITS1和ITS4(left) and phylogenetic tree based on rDNA-ITS of Bo1 and related fungi (right)
Fig.3
图4 不同温度、pH值、碳氮源以及培养基对菌落生长的影响 **, P<0.01;*, P<0.05;NS,不显著。同一时间不同处理柱上无相同字母表示差异显著(P<0.05)。
Fig.4 Influence of different temperature, pH value, culture and carbon and nitrogen source on germinating of Botryosphaeria dothidea **, P<0.01; *, P<0.05; NS, No significant.The bars of the same time without the same letters indicate the significant difference (P<0.05).
药剂名称 Fungicide | 稀释倍数 Dilution multiple | 抑菌率 Inhibition ratio/% |
---|---|---|
10%苯醚甲环唑水分散粒剂 | 5 000 | 72 d |
10% Difenoconazole WG | 7 500 | 70 cd |
11 250 | 68 c | |
16 875 | 58 b | |
25 312.5 | 55 ab | |
30 000 | 54 a | |
咯菌腈25 g·L-1悬浮种衣剂 | 5 000 | 64 e |
25g·L-1 Fludioxonil FS | 7 500 | 55 d |
11 250 | 44 c | |
16 875 | 39 c | |
25 312.5 | 10 a | |
30 000 | 19 b | |
3%中生菌素可湿性粉剂 | 5 000 | 84 e |
3% Zhongshengmycin WP | 7 500 | 80 e |
11 250 | 65 d | |
16 875 | 39 c | |
25 312.5 | 28 b | |
30 000 | 22 a | |
50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂 | 5 000 | 79 f |
50% Prochloraz-manganese chloride | 7 500 | 76 e |
complex WP | 11 250 | 67 d |
16 875 | 61 c | |
25 312.5 | 54 b | |
30 000 | 49 a | |
20%丙环唑微乳剂 | 10 000 | 91 f |
20% Propiconazole ME | 15 000 | 87 e |
20 000 | 83 d | |
25 000 | 77 c | |
30 000 | 69 b | |
50 000 | 63 a |
表2 不同药剂对桂花叶斑病原菌的抑制效果
Table 2 Inhibition effect of differential fungicide
药剂名称 Fungicide | 稀释倍数 Dilution multiple | 抑菌率 Inhibition ratio/% |
---|---|---|
10%苯醚甲环唑水分散粒剂 | 5 000 | 72 d |
10% Difenoconazole WG | 7 500 | 70 cd |
11 250 | 68 c | |
16 875 | 58 b | |
25 312.5 | 55 ab | |
30 000 | 54 a | |
咯菌腈25 g·L-1悬浮种衣剂 | 5 000 | 64 e |
25g·L-1 Fludioxonil FS | 7 500 | 55 d |
11 250 | 44 c | |
16 875 | 39 c | |
25 312.5 | 10 a | |
30 000 | 19 b | |
3%中生菌素可湿性粉剂 | 5 000 | 84 e |
3% Zhongshengmycin WP | 7 500 | 80 e |
11 250 | 65 d | |
16 875 | 39 c | |
25 312.5 | 28 b | |
30 000 | 22 a | |
50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂 | 5 000 | 79 f |
50% Prochloraz-manganese chloride | 7 500 | 76 e |
complex WP | 11 250 | 67 d |
16 875 | 61 c | |
25 312.5 | 54 b | |
30 000 | 49 a | |
20%丙环唑微乳剂 | 10 000 | 91 f |
20% Propiconazole ME | 15 000 | 87 e |
20 000 | 83 d | |
25 000 | 77 c | |
30 000 | 69 b | |
50 000 | 63 a |
[1] | 于蕾蕾, 高旭政, 苏子龙, 等. 桂花的应用和药用价值概述[J]. 湖北科技学院学报(医学版), 2022, 36(5):444-448. |
YU L L, GAO X Z, SU Z L, et al. Overview of the application and medicinal value of Osmanthus fragrans[J]. Journal of Hubei University of Science and Technology(Medical Sciences), 2022, 36(5):444-448. (in Chinese) | |
[2] | 岳淑梅, 王金梅, 康文艺. 桂花三萜类成分及降血脂作用的研究[J]. 中国实验方剂学杂志, 2013, 19(24):126-128. |
YUE S M, WANG J M, KANG W Y. Osmanthus fragrans triterpenoids and hypolipidemic effect[J]. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2013, 19(24):126-128. (in Chinese with English abstract) | |
[3] | LI H L, CHAI Z, SHEN G, et al. Polyphenol profiles and antioxidant properties of ethanol extracts from Osmanthus fragrans(Thunb.) lour. flowers[J]. Polish Journal of Food and Nutrition Sciences, 2017, 67(4):317-325. |
[4] | 包骐林, 王丹, 陆葵青, 等. 桂花黄酮类化合物体内外抗氧化活性的研究[J]. 食品研究与开发, 2018, 39(21):14-20. |
BAO Q L, WANG D, LU K Q, et al. Study on the antioxidative activities of flavonoids from Osmanthus fragrans in vivo and in vitro[J]. Food Research and Development, 2018, 39(21):14-20. (in Chinese with English abstract) | |
[5] | 王丽梅, 余龙江, 崔永明, 等. 桂花黄酮的提取纯化及抑菌活性研究[J]. 天然产物研究与开发, 2008, 20(4):717-720. |
WANG L M, YU L J, CUI Y M, et al. Flavonoids from Osmanthus fragrans:extraction and bacteriostatic activities[J]. Natural Product Research and Development, 2008, 20(4):717-720. (in Chinese with English abstract) | |
[6] | 李延浩. 开封地区桂花炭疽病菌的生物学特性及病菌毒素性质的研究[D]. 开封: 河南大学, 2010. |
LI Y H. Studies on the biological characteristics and toxin of Colletotrichum gloeosporiodes on Osmanthus fragransin Kaifeng area[D]. Kaifeng: Henan University, 2010. (in Chinese with English abstract) | |
[7] | 徐永辉, 邹燕敏, 蔡平, 等. 桂花拟盘多毛孢灰斑病生物学特性研究[J]. 上海农业科技, 2008(4):86-87. |
XU Y H, ZOU Y M, CAI P, et al. Study on the biological characteristics of Osmanthus fragrans spore gray spot disease[J]. Shanghai Agricultural Science and Technology, 2008(4):86-87. (in Chinese) | |
[8] | 王晓梅, 黄琦, 李玉. 桂花叶斑病病原鉴定及其生物学特性研究[J]. 吉林农业大学学报, 2011, 33(2):151-157. |
WANG X M, HUANG Q, LI Y. Pathogeny identification and biological characteristics of the leaf spot lesions of osmamthus fragrans[J]. Journal of Jilin Agricultural University, 2011, 33(2):151-157. (in Chinese with English abstract) | |
[9] | XIE L, HUANG S L, CEN Z L, et al. First report of Botryosphaeria dothidea causing sweet Osmanthus leaf dieback in China[J]. Agricultural Sciences in China, 2010, 9(6):847-853. |
[10] | 方中达. 植物研究方法[M]. 北京: 农业出版社, 1979. |
[11] | 任磊, 王振平. 我国葡萄溃疡病研究进展[J]. 中外葡萄与葡萄酒, 2013(4):48-52. |
REN L, WANG Z P. Research progress on grape ulcer disease in China[J]. Sino-Overseas Grapevine & Wine, 2013(4):48-52. (in Chinese) | |
[12] | 朱琪丽, 赵会长, 谢甲涛, 等. 葡萄座腔菌侵染柑橘果实的报道[J]. 植物病理学报, 2018, 48(2):154-158. |
ZHU Q L, ZHAO H C, XIE J T, et al. Report of Botryosphaeria dothidea infecting citrus[J]. Acta Phytopathologica Sinica, 2018, 48(2):154-158. (in Chinese with English abstract) | |
[13] | 张倩, 李阳, 杨埔, 等. 甜樱桃葡萄座腔菌的生物学特性研究[J]. 食品工业科技, 2020, 41(10):101-106. |
ZHANG Q, LI Y, YANG P, et al. Biological characteristics of Botryosphaeria dothoidea from sweet cherry[J]. Science and Technology of Food Industry, 2020, 41(10):101-106. (in Chinese with English abstract) | |
[14] | 吴小芹, 何月秋, 刘忠华. 葡萄座腔菌属所致树木溃疡病发生与研究进展[J]. 南京林业大学学报, 2001, 25(1):61-66. |
WU X Q, HE Y Q, LIU Z H. Occurrence and progress on tree cankers caused by Botryosphaeria spp[J]. Journal of Nanjing Forestry University, 2001, 25(1):61-66. (in Chinese) | |
[15] | JURICK W M, VICO I, GASKINS V L, et al. First report of Botryosphaeria dothidea causing white rot on apple fruit in Maryland[J]. Plant Disease, 2013, 97(7):999. |
[16] | GARIBALDI A, BERTETTI D, POLI A, et al. First report of fruit rot in pear caused by Botryosphaeria dothidea in Italy[J]. Plant Disease, 2012, 96(6):910. |
[17] | WUNDERLICH N, COSTA S S, TPOI R P, et al. First report of Botryosphaeria dothidea causing shoot blight and cankers of pistachio in Australia[J]. Australasian Plant Disease Notes, 2012, 7(1):47-49. |
[18] | CHOI I Y. First report of bark dieback on blueberry caused by Botryosphaeria dothidea in Korea[J]. Plant Disease, 2011, 95(2):227. |
[19] | MARSBERG A, KEMLER M, JAMI F, et al. Botryosphaeria dothidea:a latent pathogen of global importance to woody plant health[J]. Molecular Plant Pathology, 2017, 18(4):477-488. |
[20] | 王璠, 黄俊斌, 李国怀. 葡萄座腔菌属(Botryosphaeria)引起的果树病害及研究进展[J]. 植物保护, 2013, 39(6):7-13. |
WANG F, HUANG J B, LI G H. Occurrence of and progress in fruit tree diseases caused by Botryosphaeria spp[J]. Plant Protection, 2013, 39(6):7-13. (in Chinese with English abstract) |
[1] | 何佳薇, 黄乐琴, 卢振宇, 方瑾, 雷子阳, 张慧娟, 蒋明. 珍稀濒危植物华顶杜鹃叶斑病病原菌的分离与鉴定[J]. 浙江农业学报, 2024, 36(4): 837-845. |
[2] | 罗芷涵, 刘朋飞, 于军, 齐鹤, 陈小光, 楼兵干. 国槐枝枯病病原菌鉴定及其生物学特性[J]. 浙江农业学报, 2024, 36(3): 579-588. |
[3] | 潘长漭, 王玉珊, 黄秋月, 何建清, 巴桑旺姆, 张格杰. 卷须猴头菌的鉴定及生物学特性研究[J]. 浙江农业学报, 2024, 36(10): 2229-2237. |
[4] | 冯连荣, 张妍, 赵鑫闻, 宋立志, 梁德军. 一株野生金针菇菌种的分离、鉴定与生物学特性研究[J]. 浙江农业学报, 2023, 35(5): 1088-1096. |
[5] | 孙珊珊, 其美拉姆, 李强, 曾南方, 郑诚, 张白玉, 颜其贵. 表达PRRSV NADC30-like毒株GP5-M的重组伪狂犬病病毒的构建及其生物学特性探究[J]. 浙江农业学报, 2023, 35(11): 2555-2567. |
[6] | 王志鹏, 赵剑, 黄盼, 崔雪梅, 南黎, 宋厚辉, 鲍国连, 刘燕. 兔源大肠埃希菌噬菌体分离鉴定与生物学特性研究[J]. 浙江农业学报, 2022, 34(8): 1599-1608. |
[7] | 杨玲, 沙楠景, 潘鹏举, 吴伯志. 云南地区铁线莲叶枯病病原菌的鉴定和主要生物学特性[J]. 浙江农业学报, 2022, 34(7): 1449-1456. |
[8] | 陈润臣, 王艺凝, 刘潇文, 王红艳, 丁强, 王鸿磊. 一株野生多脂鳞伞的鉴定、人工栽培与营养成分分析[J]. 浙江农业学报, 2021, 33(12): 2330-2338. |
[9] | 李戌清, 严建立, 阮松林. 三叶青炭疽病病原菌的鉴定与生物学特性[J]. 浙江农业学报, 2020, 32(11): 2009-2019. |
[10] | 李戌清, 张敬泽, 张雅, 吴根良. 浙江省绍兴市茄子黄萎病菌菌株致病型鉴定及其生物学特性研究[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(5): 784-789. |
[11] | 康海婷, 凌丹燕, 吴志娟, 路梅, 宗宇, 郭卫东. 蓝莓枝干溃疡病病原鉴定及品种抗病性研究[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(3): 436-443. |
[12] | 周会明, 张焱珍, 柴红梅, 杨荣情, 谭莹, 张萍萍, 白玉英, 赵一莲, 金玉洁. 一株临沧野生黄鸡?的鉴定与生长条件研究[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(10): 1655-1662. |
[13] | 马晓平, 杨秋霞, 俞演, 李德生, 王承东, 凌珊珊, 古玉. 大熊猫源枝孢样枝孢霉野生株(Z20)与突变株(Zt)部分生物学特性及药敏试验比较[J]. 浙江农业学报, 2018, 30(8): 1328-1335. |
[14] | 雷雪平, 耿毅, 余泽辉, 郑李平, 曹师琪, 黄小丽, 陈德芳, 欧阳萍, 刘恺睿. 棘胸蛙脑膜炎败血伊丽莎白菌的分离鉴定及其感染的病理损伤[J]. 浙江农业学报, 2018, 30(3): 371-377. |
[15] | 马晓平, 杨天意, 俞演, 张志和, 王承东, 古玉. 大熊猫阴道源乳酸杆菌生物学特性研究[J]. 浙江农业学报, 2017, 29(7): 1093-1102. |
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