›› 2008, Vol. 20 ›› Issue (5): 0-332.

• 论文 •    

猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量PCR检测方法的建立

徐辉;方立;陈伟杰;赵灵燕;倪柏锋;方维焕   

  1. 浙江大学,动物预防医学研究所,浙江省重点实验室,浙江,杭州,310029;浙江省畜牧兽医局,浙江,杭州,310020;浙江省畜牧兽医局,浙江,杭州,310020;浙江大学,动物预防医学研究所,浙江省重点实验室,浙江,杭州,310029
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-09-25 发布日期:2008-09-25

Quantitative TaqMan real-time PCR for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-09-25 Published:2008-09-25

摘要: 针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)N基因保守序列设计引物与TaqMan探针,在建立常规PCR的基础上,设计并优化了TaqMan荧光定量PCR方法用于PRRSV核酸的检测.应用新建立的荧光定量PCR方法检测其它主要猪病病原,无任何非特异性反应;针对PRRSV阳性克隆质粒的检测灵敏度可以达到1.2×101 copy/ml,比常规PCR高100倍;通过对48份临床疑似样本的检测表明有29份样本为PRRSV阳性,与巢式PCR检测结果一致,而常规PCR只能检出其中19份阳性样本,灵敏度优于常规PCR方法.结果表明,试验建立的PRRSV TaqMan荧光定量PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可为PRRSV临床诊断提供一个更为有效的方法.

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒, 荧光定量PCR, TaqMan探针