浙江农业学报 ›› 2024, Vol. 36 ›› Issue (5): 1015-1023.DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.20230736
马丽娜1(), 田进阳2, 王锦1, 赵正伟1, 马青1,*(
)
收稿日期:
2023-06-07
出版日期:
2024-05-25
发布日期:
2024-05-29
作者简介:
马丽娜(1985—),女,宁夏石嘴山人,硕士,副研究员,研究方向为动物遗传育种。E-mail:malina_2007nian@163.com
通讯作者:
* 马青, E-mail: maqing1973@126.com
基金资助:
MA Li’na1(), TIAN Jinyang2, WANG Jin1, ZHAO Zhengwei1, MA Qing1,*(
)
Received:
2023-06-07
Online:
2024-05-25
Published:
2024-05-29
摘要:
为探索滩羊成纤维细胞生长因子5(fibroblast growth factor,FGF5)和辅酶Q9(coenzyme Q9,COQ9)基因的多态性及其与生长性状的关联性,运用分子标记辅助育种方法,为提高滩羊的生长性状提供理论依据。针对前期研究中筛选出的位点采用SNP分型技术对107只滩羊进行FGF5和COQ9基因多态性检测,并与初生重、二毛期(35日龄)、6月龄和12月龄体重进行关联分析。结果表明,通过与绵羊参考基因组(GCF_000298735.2_Oar_v4.0)比对,在滩羊FGF5基因上筛选出2个SNPs位点,分别为g.94540629T>G和g.94540642T>C,其中g.94540629T>G位点产生TT、GT和GG共3种基因型,g.94540642T>C位点产生TT、TC和CC共3种基因型;在COQ9基因上筛选出3个SNP位点,分别为g.94503480A>G、g.24807700A>G和g.24812228T>C,其中g.94503480A>G位点产生AA、AG、GG共3种基因型,g.24807700A>G位点产生AA、AG、GG共3种基因型,g.24812228T>C位点产生TT、TC和CC共3种基因型。基因多态性分析表明,5个SNPs位点属于高度多态,且在滩羊群体处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);关联分析结果显示,FGF5基因g.94540642T>C位点C/T基因型12月体重显著大于其他基因型(P<0.05),COQ9基因g.24807700A>G位点GG基因型12月体重显著大于其他基因型(P<0.05),g.24812228T>C位点C/C基因型12月体重显著大于其他基因型(P<0.05),由此可知,3个SNP位点对滩羊12月龄体重有显著影响;COQ9基因g.24812228T>C和g.24807700A>G位点在滩羊群体处于强连锁不平衡,FGF5基因g.94540629T>G和g.94540642T>C位点在滩羊群体处于强连锁不平衡,COQ9基因g.94503480A>G、g.24807700A>G和g.24812228T>C位点和基因型组合A/GA/AT/T与A/GA/GT/C在出生重、6月体重和12月体重显著高于其他组合基因型(P<0.05)。FGF5和COQ9基因多态性与滩羊生长性状显著相关,FGF5和COQ9基因可作为滩羊生长性状选育的候选基因,可作为滩羊体重性状的分子标记,通过常规育种结合分子标记辅助选择来提高滩羊的选育效率。
中图分类号:
马丽娜, 田进阳, 王锦, 赵正伟, 马青. 滩羊FGF5、COQ9基因多态性及其与生长性状的关联分析[J]. 浙江农业学报, 2024, 36(5): 1015-1023.
MA Li’na, TIAN Jinyang, WANG Jin, ZHAO Zhengwei, MA Qing. Association of FGF5 and COQ9 gene polymorphism and growth traits in Tan sheep[J]. Acta Agriculturae Zhejiangensis, 2024, 36(5): 1015-1023.
基因名称 Gene name | 位点名称 Site name | Chr | Pos. | Ref | Alt | 引物序列 Primer sequence(5'-3') | 退火温度 Annealing temperature/℃ | 片段长度 Fragment length/bp | Func.ref gene |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Fibroblast growth factor 5 (FGF5) | chr6_94540629 | 6 | 94540629 | G | T | F:CAGAATCTCTTACCCCTCCTGC R:CAGGTCTTAATTGCAGCATGTG | 58 | 246 | UTR |
chr6_94540642 | 6 | 94540642 | C | T | F:CGATCCAGGGATTGAACCAG R:TCCATGTGCCAGGTCTTAATTG | 58 | 272 | UTR | |
Coenzyme Q9 (COQ9) | chr6_94503480 | 6 | 94503480 | A | G | F:GGTACGTGGCCCTGAACAAG R:GTTAGGACTTCTCCGAGGTGC | 58 | 209 | CDS |
chr14_24807700 | 14 | 24807700 | G | A | F:GTCCTCGTGGATTACAGTTTGG R:TGTCAGTATCAGTGTGTGAGTGCC | 58 | 207 | intron | |
chr14_24812228 | 14 | 24812228 | C | T | F:CCCCAGGGTGACAGTGTGTTC R:GCCACTCACATCTCCAGGAAC | 58 | 202 | intron |
表1 引物序列信息
Table 1 Primer sequence information
基因名称 Gene name | 位点名称 Site name | Chr | Pos. | Ref | Alt | 引物序列 Primer sequence(5'-3') | 退火温度 Annealing temperature/℃ | 片段长度 Fragment length/bp | Func.ref gene |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Fibroblast growth factor 5 (FGF5) | chr6_94540629 | 6 | 94540629 | G | T | F:CAGAATCTCTTACCCCTCCTGC R:CAGGTCTTAATTGCAGCATGTG | 58 | 246 | UTR |
chr6_94540642 | 6 | 94540642 | C | T | F:CGATCCAGGGATTGAACCAG R:TCCATGTGCCAGGTCTTAATTG | 58 | 272 | UTR | |
Coenzyme Q9 (COQ9) | chr6_94503480 | 6 | 94503480 | A | G | F:GGTACGTGGCCCTGAACAAG R:GTTAGGACTTCTCCGAGGTGC | 58 | 209 | CDS |
chr14_24807700 | 14 | 24807700 | G | A | F:GTCCTCGTGGATTACAGTTTGG R:TGTCAGTATCAGTGTGTGAGTGCC | 58 | 207 | intron | |
chr14_24812228 | 14 | 24812228 | C | T | F:CCCCAGGGTGACAGTGTGTTC R:GCCACTCACATCTCCAGGAAC | 58 | 202 | intron |
图1 滩羊基因组DNA琼脂糖凝胶电泳 M, DL3000 DNA marker(生工B500347);1~12,不同个体 DNA 样本。
Fig.1 Agarose gel electrophoresis of Tan sheep genomic DNA M, DL3000 DNA marker (Sagon B500347); 1-12, DNA samples from different individuals.
图2 滩羊FGF5和COQ9基因SNP位点PCR产物 M为DL3000 DNA marker(生工B500347);1、2为FGF5基因g. 94540629 T>G位点PCR产物(246 bp), 3、4为g. 94540642 T>C位点PCR产物(273 bp);5、6为COQ9基因g. 94503480 A>G位点PCR产物(209 bp),7、8为g. 24807700 A>G位点PCR产物(207 bp),9~12为g. 24812228 T>C位点PCR产物(202 bp)。
Fig.2 The PCR products of SNPs of FGF5 and COQ9 in Tan sheep M: DL3000 DNA marker (Sagon B500347); 1, 2 are PCR products of FGF5 gene g. 94540629 T>G (246 bp); 3, 4 are PCR products of g. 94540642 T>C (273 bp); 5, 6 are PCR products of COQ9 gene g. 94503480 A>G (209 bp); 7, 8 are PCR product of g. 24807700 A>G (207 bp); 9-12 are PCR product of g. 24812228 T>C (202 bp).
位点编号 Loci number | 位点名称 Loci name | 基因型 Genotype | 基因频率 gene frequency | 等位基因 Frequencies | 频率 Allelic gene | 纯合度 Ho | 杂合度 He | 有效等位 基因数 Ne | 多态信息 含量 PIC | P |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
SNP1 | chr6:94503480 | AA(70) | 0.65 | A | 0.82 | 0.70 | 0.30 | 1.43 | 0.25 | 1.0 |
AG(32) | 0.30 | G | 0.18 | |||||||
GG(3) | 0.03 | |||||||||
SNP2 | chr6:94540629 | TT(73) | 0.68 | T | 0.81 | 0.75 | 0.25 | 1.34 | 0.25 | 0.20 |
TG(28) | 0.26 | G | 0.19 | |||||||
GG(6) | 0.06 | |||||||||
SNP3 | chr6: 94540642 | TT(73) | 0.68 | T | 0.81 | 0.75 | 0.25 | 1.34 | 0.25 | 0.11 |
TC(28) | 0.26 | C | 0.19 | |||||||
CC(6) | 0.06 | |||||||||
SNP4 | chr14:24807700 | AA(30) | 0.28 | A | 0.55 | 0.49 | 0.51 | 2.06 | 0.37 | 0.85 |
AG(56) | 0.52 | G | 0.45 | |||||||
GG(21) | 0.20 | |||||||||
SNP5 | chr14:24812228 | TT(30) | 0.28 | T | 0.55 | 0.49 | 0.51 | 2.06 | 0.37 | 0.85 |
TC(56) | 0.52 | C | 0.45 | |||||||
CC(21) | 0.20 |
表2 滩羊群体FGF5和COQ9基因SNPs多态位点的群体遗传学参数
Table 2 The population genetic parameters of SNPs polymorphic loci of FGF5 and COQ9 in Tan sheep population
位点编号 Loci number | 位点名称 Loci name | 基因型 Genotype | 基因频率 gene frequency | 等位基因 Frequencies | 频率 Allelic gene | 纯合度 Ho | 杂合度 He | 有效等位 基因数 Ne | 多态信息 含量 PIC | P |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
SNP1 | chr6:94503480 | AA(70) | 0.65 | A | 0.82 | 0.70 | 0.30 | 1.43 | 0.25 | 1.0 |
AG(32) | 0.30 | G | 0.18 | |||||||
GG(3) | 0.03 | |||||||||
SNP2 | chr6:94540629 | TT(73) | 0.68 | T | 0.81 | 0.75 | 0.25 | 1.34 | 0.25 | 0.20 |
TG(28) | 0.26 | G | 0.19 | |||||||
GG(6) | 0.06 | |||||||||
SNP3 | chr6: 94540642 | TT(73) | 0.68 | T | 0.81 | 0.75 | 0.25 | 1.34 | 0.25 | 0.11 |
TC(28) | 0.26 | C | 0.19 | |||||||
CC(6) | 0.06 | |||||||||
SNP4 | chr14:24807700 | AA(30) | 0.28 | A | 0.55 | 0.49 | 0.51 | 2.06 | 0.37 | 0.85 |
AG(56) | 0.52 | G | 0.45 | |||||||
GG(21) | 0.20 | |||||||||
SNP5 | chr14:24812228 | TT(30) | 0.28 | T | 0.55 | 0.49 | 0.51 | 2.06 | 0.37 | 0.85 |
TC(56) | 0.52 | C | 0.45 | |||||||
CC(21) | 0.20 |
位点编号 Loci number | 位点名称 Loci name | 基因型 Genotype | 出生重 Birth weight/kg | 二毛重 35-day weight/kg | 6月体重 6-month weight/kg | 12月体重 12-month weight/kg |
---|---|---|---|---|---|---|
SNP1 | chr6:94503480 | A/A | 5.45±0.07 | 16.21±0.29 | 32.78±0.67 | 44.25±0.80 |
A/G | 5.32±0.11 | 15.29±0.44 | 31.25±1.01 | 45.47±1.20 | ||
G/G | 5.66±0.38 | 18.73±1.44 | 32.86±3.32 | 44.00±3.94 | ||
SNP2 | chr6:94540629 | T/T | 5.33±0.09 | 15.96±0.36 | 32.40±0.82 | 45.32±0.96 |
T/G | 5.43±0.09 | 16.07±0.36 | 32.28±0.81 | 43.73±0.95 | ||
G/G | 5.55±0.27 | 15.63±1.05 | 32.10±2.37 | 45.66±2.78 | ||
SNP3 | chr6: 94540642 | C/C | 5.44±0.09 | 16.04±0.35 | 32.44±0.80 | 43.89±0.94 b |
C/T | 5.31±0.12 | 15.71±0.49 | 31.90±1.11 | 47.17±1.30 a | ||
T/T | 5.47±0.12 | 16.20±0.48 | 32.53±1.09 | 44.44±1.28 b | ||
SNP4 | chr14:24807700 | A/A | 5.50±0.12 | 16.48±0.45 | 32.57±0.99 | 44.66±1.21 b |
A/G | 5.35±0.08 | 15.44±0.33 | 31.02±0.75 | 43.85±0.92 b | ||
G/G | 5.47±1.13 | 16.75±0.54 | 37.39±1.21 | 48.51±1.48 a | ||
SNP5 | chr14:24812228 | T/T | 5.50±0.11 | 16.48±0.45 | 32.57±0.99 | 44.66±1.21 b |
T/C | 5.35±0.08 | 15.44±0.33 | 31.02±0.75 | 43.85±0.91 b | ||
C/C | 5.47±0.15 | 16.75±0.55 | 36.39±1.21 | 49.22±1.48 a |
表3 FGF5和COQ9基因SNPs位点与滩羊生长性状的关联分析
Table 3 Correlation analysis of SNPs loci of FGF5 and COQ9 with growth traits of Tan Sheep
位点编号 Loci number | 位点名称 Loci name | 基因型 Genotype | 出生重 Birth weight/kg | 二毛重 35-day weight/kg | 6月体重 6-month weight/kg | 12月体重 12-month weight/kg |
---|---|---|---|---|---|---|
SNP1 | chr6:94503480 | A/A | 5.45±0.07 | 16.21±0.29 | 32.78±0.67 | 44.25±0.80 |
A/G | 5.32±0.11 | 15.29±0.44 | 31.25±1.01 | 45.47±1.20 | ||
G/G | 5.66±0.38 | 18.73±1.44 | 32.86±3.32 | 44.00±3.94 | ||
SNP2 | chr6:94540629 | T/T | 5.33±0.09 | 15.96±0.36 | 32.40±0.82 | 45.32±0.96 |
T/G | 5.43±0.09 | 16.07±0.36 | 32.28±0.81 | 43.73±0.95 | ||
G/G | 5.55±0.27 | 15.63±1.05 | 32.10±2.37 | 45.66±2.78 | ||
SNP3 | chr6: 94540642 | C/C | 5.44±0.09 | 16.04±0.35 | 32.44±0.80 | 43.89±0.94 b |
C/T | 5.31±0.12 | 15.71±0.49 | 31.90±1.11 | 47.17±1.30 a | ||
T/T | 5.47±0.12 | 16.20±0.48 | 32.53±1.09 | 44.44±1.28 b | ||
SNP4 | chr14:24807700 | A/A | 5.50±0.12 | 16.48±0.45 | 32.57±0.99 | 44.66±1.21 b |
A/G | 5.35±0.08 | 15.44±0.33 | 31.02±0.75 | 43.85±0.92 b | ||
G/G | 5.47±1.13 | 16.75±0.54 | 37.39±1.21 | 48.51±1.48 a | ||
SNP5 | chr14:24812228 | T/T | 5.50±0.11 | 16.48±0.45 | 32.57±0.99 | 44.66±1.21 b |
T/C | 5.35±0.08 | 15.44±0.33 | 31.02±0.75 | 43.85±0.91 b | ||
C/C | 5.47±0.15 | 16.75±0.55 | 36.39±1.21 | 49.22±1.48 a |
基因型 Combination genotype | 出生重 Birth weight | 二毛重 35-day weight | 6月体重 6-month weight | 12月体重 12-month weight |
---|---|---|---|---|
T/TT/T(85) | 5.65±0.49 | 16.51±1.17 | 36.03±0.53 | 49.05±1.28 |
G/GC/C(16) | 5.94±0.31 | 17.63±1.44 | 38.93±1.34 | 49.66±1.68 |
T/GT/C(15) | 5.86±0.58 | 17.05±1.41 | 34.89±1.32 | 46.71±1.94 |
表4 FGF5基因SNPs位点组合基因型与滩羊生长性状的关联分析
Table 4 Association analysis of FGF5 gene SNPs combination genotype and growth traits in Tan sheep kg
基因型 Combination genotype | 出生重 Birth weight | 二毛重 35-day weight | 6月体重 6-month weight | 12月体重 12-month weight |
---|---|---|---|---|
T/TT/T(85) | 5.65±0.49 | 16.51±1.17 | 36.03±0.53 | 49.05±1.28 |
G/GC/C(16) | 5.94±0.31 | 17.63±1.44 | 38.93±1.34 | 49.66±1.68 |
T/GT/C(15) | 5.86±0.58 | 17.05±1.41 | 34.89±1.32 | 46.71±1.94 |
基因型 Combination genotype | 出生重 Birth weight | 二毛重 35-day weight | 6月体重 6-month weight | 12月体重 12-month weight |
---|---|---|---|---|
A/AA/GT/C(35) | 5.23±0.33 b | 16.34±1.09 | 36.76±0.23 b | 48.75±1.34 b |
A/AG/GC/C(6) | 5.43±0.12 b | 16.53±1.21 | 37.11±1.32 b | 47.76±1.19 b |
A/GA/AT/T(10) | 5.70±0.26 a | 17.77±1.91 | 39.89±1.09 a | 49.43±1.24 a |
A/AA/AT/T/C(20) | 5.45±0.34 b | 16.44±1.29 | 36.30±0.27 b | 48.56±1.53 b |
A/GA/GT/C(21) | 5.84±0.29 a | 17.63±1.32 | 39.95±1.02 a | 49.73±1.92 a |
A/AG/GC/C(8) | 5.36±0.38 b | 16.67±1.34 | 35.21±1.56 b | 45.39±1.09 b |
表5 COQ9基因SNPs位点组合基因型与滩羊生长性状的关联分析
Table 5 Association analysis of COQ9 gene SNPs combination genotype and growth traits in Tan sheep
基因型 Combination genotype | 出生重 Birth weight | 二毛重 35-day weight | 6月体重 6-month weight | 12月体重 12-month weight |
---|---|---|---|---|
A/AA/GT/C(35) | 5.23±0.33 b | 16.34±1.09 | 36.76±0.23 b | 48.75±1.34 b |
A/AG/GC/C(6) | 5.43±0.12 b | 16.53±1.21 | 37.11±1.32 b | 47.76±1.19 b |
A/GA/AT/T(10) | 5.70±0.26 a | 17.77±1.91 | 39.89±1.09 a | 49.43±1.24 a |
A/AA/AT/T/C(20) | 5.45±0.34 b | 16.44±1.29 | 36.30±0.27 b | 48.56±1.53 b |
A/GA/GT/C(21) | 5.84±0.29 a | 17.63±1.32 | 39.95±1.02 a | 49.73±1.92 a |
A/AG/GC/C(8) | 5.36±0.38 b | 16.67±1.34 | 35.21±1.56 b | 45.39±1.09 b |
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