鸭瘟病毒PCR检测方法的建立

›› 2010, Vol. 22 ›› Issue (6): 750-753.

鸭瘟病毒PCR检测方法的建立

魏雪涛¹,张晓勇²,李银¹,刘宇卓¹,张敬峰¹,聂文军³

¹江苏省农业科学院兽医研究所，农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室，国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京 210014；²浙江省嘉兴市出入境检验检疫局,浙江嘉兴 314001；³南京市浦口区兽医站，江苏南京 211800

收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2010-11-25 发布日期:2010-11-25

Establishment of PCR method for detecting Duck plague virus

WEI Xue-tao;ZHANG Xiao-yong;LI Yin;LIU Yu-zhuo;ZHANG Jing-feng;NIE wen-jun

¹ Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology, Ministry of Agriculture National Center for Engineering Research of Veterinary Bio-products, Institute of Veterinary Medicine, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China;²Jiaxing Enter-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Jiaxing 314001, China; ³Animal and Veterinary Station in Pukou District, Nanjing City, Nanjing 211800,China

Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2010-11-25 Published:2010-11-25

摘要/Abstract

摘要： 根据GenBank 发表的鸭瘟病毒(DPV)的基因序列,设计了针对DPV UL6 UL7保守区1对特异性引物。通过对反应条件的优化,建立了鸭瘟病毒快速鉴别诊断的PCR方法,扩增片段大小为1 293 bp。试验结果表明PCR法具有很强的特异性,且敏感性较高,最低DNA模板检出量为15 pg/mL。对鸭瘟的临床病料检测证明,该方法具有特异、快速和敏感的特点,可有效鉴别DPV。

关键词: 鸭瘟病毒, PCR, 检测

Abstract: According to the conserved gene sequences of Duck plague virus(DPV) in GenBank, one pair of specific primer was designed. A rapid diagnostic technique of PCR was established by optimizing the reaction condition. The DNA segments amplified were 1 293 bp. The experiments had proved that PCR possessed a high specificity. And the sensitivity test results indicated that PCR was more sensitive, which could detect DHV with only 15 pg·mL^-1 DNA. Detection of field samples from viral diseased ducks also confirmed that the PCR method could identify the infection of DPV, which was specific, rapid and sensitive．

Key words: Duck hepatitis virus, PCR, detection

魏雪涛;张晓勇;李银;刘宇卓;张敬峰;聂文军. 鸭瘟病毒PCR检测方法的建立[J]. , 2010, 22(6): 750-753.

WEI Xue-tao;ZHANG Xiao-yong;LI Yin;LIU Yu-zhuo;ZHANG Jing-feng;NIE wen-jun. Establishment of PCR method for detecting Duck plague virus[J]. , 2010, 22(6): 750-753.

[1]	张飘, 贺欣薇, 杨霞, 曾茂芹, 刘妍罕, 张扬子, 杨颖, 温贵兰, 程振涛, 文明. 鸭源NF-κB1基因荧光定量PCR方法建立及其初步应用[J]. 浙江农业学报, 2021, 33(2): 215-222.
[2]	王伟科, 陆娜, 闫静, 宋吉玲, 袁卫东, 周祖法. 秀珍菇S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(PpSAMS)的克隆与表达分析[J]. 浙江农业学报, 2021, 33(1): 62-68.
[3]	徐秀红, 刘金亮, 李栋成, 刘仁祥. 不同类型烟草种质的烟碱含量变化与相关基因表达水平[J]. 浙江农业学报, 2020, 32(9): 1555-1563.
[4]	黄小珍, 乔中全, 曾慧杰, 李永欣, 何钢, 王晓明. 紫薇花器官发育调控基因LiFUL1的分离与表达分析[J]. 浙江农业学报, 2020, 32(7): 1206-1214.
[5]	陆锡昆, 罗亚辉, 蒋蘋, 胡文武. 基于高光谱的油茶籽含水量检测方法[J]. 浙江农业学报, 2020, 32(7): 1302-1310.
[6]	孙瑞萍, 王峰, 晁哲, 刘海隆, 邢漫萍, 刘圈炜, 黄丽丽, 郑心力, 魏立民. 屯昌猪PDK4基因克隆及其组织表达分析[J]. 浙江农业学报, 2020, 32(6): 978-985.
[7]	云涛, 华炯钢, 叶伟成, 倪征, 陈柳, 张存. 新型鸭呼肠孤病毒一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用[J]. 浙江农业学报, 2020, 32(4): 571-576.
[8]	徐麒麟, 齐桂兰, 莫桂林, 朱江, 雷春龙, 吴永胜, 许祯莹, 李娟. 蚯蚓提取液对家蚕热激蛋白水平及免疫功能的影响[J]. 浙江农业学报, 2020, 32(4): 593-600.
[9]	张玉龙, 马志宇, 崔耀成, 谭天宇, 姚彩霞, 樊利虹, 左之才, 才冬杰. 肉牛呼吸道感染主要细菌性病原多重PCR检测方法的建立[J]. 浙江农业学报, 2020, 32(2): 210-217.
[10]	姜瑶瑶, 李静, 蔡年俊, 陈剑平, 张恒木. 一个植物原纤维蛋白基因的克隆及其表达特性分析[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(9): 1399-1404.
[11]	白俊艳, 曹恒, 王旭, 杨又兵, 樊红灯, 付学言, 时坤鹏, 董智豪, 卢小宁, 李新月, 郝伟光, 李子衡, 郑飞扬. 绵羊GH基因的Pvu Ⅱ 位点的多态性与其生长性状的关联分析[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(9): 1416-1422.
[12]	纪艺, 姜媛媛, 汪小福, 徐晓丽, 徐俊锋, 李玥莹, 陈笑芸. 几种动物生鲜肌肉组织样品DNA提取方法的比较研究[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(9): 1471-1477.
[13]	赵建霞, 沈颖越, 冯伟林, 金群力, 宋婷婷, 范丽军, 蔡为明. 双孢蘑菇内参基因的筛选与矫正[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(8): 1312-1320.
[14]	陈琳, 周青青, 顾青, 郦萍. 实时定量PCR法快速检测水产品中的副溶血性弧菌[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(5): 823-828.
[15]	孟幼青, 汪恩国, 李艳敏, 明珂, 袁亦文. 柑橘黄龙病菌PCR阳性病株空间分布格局与参数特征应用研究[J]. 浙江农业学报, 2019, 31(4): 579-587.