›› 2007, Vol. 19 ›› Issue (1): 0-10.

• 论文 •    

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 APX Ⅱ基因特异片段的克隆和表达

袁秀芳;王一成;徐丽华;张存;叶伟成   

  1. 浙江省农业科学院,畜牧兽医研究所,浙江,杭州,310021
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-01-25 发布日期:2007-01-25

Cloning and expressing of Actinobacillus pleuropneumonia APX Ⅱ gene

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2007-01-25 Published:2007-01-25

摘要: 将猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 APXⅡ的一段毒素基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点中,经鉴定后得到重组质粒pET- APXⅡ, 并将其转化到受体菌BL21中,诱导剂IPTG进行诱导表达,4 h后达到高峰.经12SDS-PAGE电泳检测,表达得到的融合蛋白大小约为31 kD.经Western blotting分析,表达蛋白能与APP阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应,说明该表达蛋白具有免疫原性,这为下一步用此表达蛋白作为抗原,对APP进行诊断试剂的研制和基因工程疫苗的研究提供科学依据.

关键词: 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌, 克隆, 表达, Westernblotting