›› 2007, Vol. 19 ›› Issue (2): 0-96.

• 论文 •    

分离缓冲液对水稻细胞核悬液DNA分辨率效应的比较

金亮;张宪银;薛庆中   

  1. 浙江大学,农业与生物技术学院,农学系,浙江,杭州,310029
  • 收稿日期:1900-01-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-03-25 发布日期:2007-03-25

Comparison on the effects of different isolation buffer on the DNA resolution of the cell nucleus suspensions from rice

  • Received:1900-01-01 Revised:1900-01-01 Online:2007-03-25 Published:2007-03-25

摘要: 为制备高纯度水稻细胞核悬液供FACSCalibur流式细胞仪使用,选用6种细胞核分离缓冲液制备样品,对其DNA分辨率效果进行比较,Otto buffers和Marie's nuclear isolation buffer表现分辨率较高,细胞G0/1峰产生的变异系数较低(CV分别为3.57和3.41);其中Otto buffers的组分较Marie's nuclear isolation buffer简单、成本低,且能在正常室温条件下分析和保存.虽然在细胞核悬液中Tris-MgCl2 buffer显示最低的CV值(3.19),但产生较多的背景碎片.而其余3种缓冲液(Lysis buffer LB01,Galbraith's buffer和Arumuganathan's buffer)的变异系数均较高(分别为4.75,6.28和6.73).结果表明采用Otto buffers分离缓冲液制备细胞核悬浮液,能实现苗期对水稻花粉植株的不同倍性(单倍体、二倍体、三倍体等)快速鉴定.

关键词: 水稻, 流式细胞术, 核悬液, 细胞核分离缓冲液