浙江农业学报

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根癌农杆菌介导的甜瓜遗传转化

方丽;任海英;茹水江;王汉荣*

2009, 21(3): 0-214.

摘要 ( 1479 )

PDF(279KB) ( 1597 )

以甜瓜子叶为根癌农杆菌介导转化的受体，通过GUS基因瞬间表达率的分析，研究影响转化体系的重要试验参数。试验结果表明，甜瓜对卡那霉素耐性高，筛选浓度可高达150 mg／L，Ag+ 能促进转化率，而Ag+不能促进转化率。前期的消毒效果与季节有很大的关系，不同季节选择不同的消毒方式更能节约种质资源。

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浙东白鹅GAPDH基因的扩增及其在荧光定量PCR中的应用

褚晓红;胡锦平;翁经强;徐如海;黄少珍;徐宁迎;*

2009, 21(3): 0-219.

摘要 ( 885 )

PDF(267KB) ( 1358 )

三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是一种糖酵解酶，在脊椎动物的所有组织均有稳定的表达，经常作为看家基因来研究基因的表达，本研究分析了鸭GAPDH基因序列，设计了一对引物，利用PCR，RT-PCR技术扩增得到了浙东白鹅的GAPDH基因的DNA序列为235 bp，mRNA序列为209 bp，作为参比基因应用于荧光定量PCR来研究目标基因的表达，目标基因在mRNA水平上的表达量可通过参比基因校正cDNA加入量的不同来研究，荧光定量PCR显示了以cDNA为模板，此引物扩增时Ct具有单一的溶解曲线，说明其表达稳定，可以作为参比基因用于浙东白鹅基因的定量表达研究。

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杂交早稻保持系沪旱1 B柱头外露率的QTL定位

岳高红;梅捍卫;潘彬荣;楼珏;李明寿;罗利军;*;

2009, 21(3): 0-245.

摘要 ( 3855 )

PDF(322KB) ( 1569 )

本研究利用沪旱1B／Ⅱ-32B杂交的群体，对水稻的柱头外露率性状进行了QTL分析，研究其遗传机制，以改良沪旱1B的柱头外露率。试验共检测到1O个与柱头外露率有关的QTLs，分布在4条染色体上，加性效应起主要作用。检测到3个影响单边柱头外露率(PSES)的，分别位于3号、7号和9号染色体上，联合贡献率为21．44％；检测到2个影响双边柱头外露率(PDES)的QTLs，位于3号和9号染色体上，联合贡献率为15．98％；检测到5个影响总柱头外露率(PES)的QTLs，位于3，4，7，9号染色体上，其中3号染色体上有2个位点，总柱头外露率QTL 的单独贡献率在6．86％一9．73％之间，联合贡献率为39．42％。QTL上位性分析，检测到7对显著互作位点，解释了表型变异的67．39％，检测到的上位性效应主要以加性／加性互作效应为主，部分主效参与了互作。这些QTLs分子标记为改良沪旱1B的柱头外露率性状进行分子标记辅助选择提供参考。

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不同栽培方式和施氮量对稻米营养品质及植酸积累的影响

赵宁春;张小明;叶胜海;程方民;*

2009, 21(3): 0-263.

摘要 ( 1627 )

PDF(330KB) ( 1617 )

试验设常规水作(C1)、覆膜旱作(C2)和裸地旱作(c3)3种栽培方式处理，每一栽培方式又分别设不施氮肥(N1，0 kg／hm2)、施用低氮(N2，124 kg／hm2)和高氮肥(N3，150 kg/hm2)3水平的肥料处理，对不同栽培方式和施氮处理下稻米营养品质和植酸积累的差异变化进行了比较分析。结果表明，旱作条件下水稻籽粒中的总磷含量有所提高，而籽粒植酸和无机磷的含量则有所降低；在相同的施氮水平下，裸地旱作水稻籽粒中的氮素含量显著低于覆膜旱作和常规水作处理，但施氮处理对稻米蛋白组分和植酸含量的影响因栽培方式而异。这说明合理施肥和水分管理方式可以改善水稻的氮素营养，提高籽粒蛋白质含量，适当减少抗营养物质植酸含量。施用氮肥可显著增加稻米中总磷积累量。

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喜树碱对稻飞虱、二化螟和蚜虫的杀虫作用评价

童森淼;王品维;孙逸钊;张立钦;*;马建义;盛仙俏

2009, 21(3): 0-292.

摘要 ( 2034 )

PDF(288KB) ( 1445 )

以喜树碱为活性成份，筛选新生物源杀虫剂。室内生物测定结果表明：0．2％的喜树碱乳油对甘蓝蚜虫、水稻稻飞虱和二化螟有较高的生物活性，其ECho和ECho分别为0．1～0．6 mg／L和0．4～5．0 mg/ L，其对3种靶标害虫的活性大小依次为：水稻稻飞虱>甘蓝蚜虫>水稻二化螟。田间试验发现，0．2％的喜树碱乳油对蚜虫和稻飞虱的最大防效达到70％～95％，对照药剂10％蚜虱净的最大防效为63％一98％，两者无显著差异；0．2％的喜树碱乳油对水稻二化螟的保苗效果和防效分别为85％和88％，同时5％锐劲特的保苗效果和防效分别为93％和95％两者无显著差异。因此，喜树碱是具有较高活性的新生物源杀虫剂。

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猪细小病毒SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法的建立

李明凤;魏战勇;王学斌;张红英;王亚宾;崔保安;*

2009, 21(3): 0-224.

摘要 ( 1346 )

PDF(301KB) ( 1918 )

利用PCR技术扩增出猪细小病毒VP2保守区基因194 bp片段，并克隆到pGEMT载体上，纯化质粒作为PCR检测的标准模板，以l0倍梯度稀释质粒为标准模板，进行SYBRGreenI荧光定量PCR扩增并制作标准曲线，建立了猪细小病毒的荧光定量PCR检测方法。该方法检测灵敏度可达1．0×10 2 拷贝／μL ，与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒不发生交叉反应，具有良好的特异性和重复性；对10份疑似病料和阴性病料进行了检测，发现10份均为荧光定量PCR 阳性。而常规PCR只能检测出7份阳性。结果表明，建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点，可用于临床猪细小病毒(PPV)的检测。

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Race法扩增4株鸭肝炎病毒3' 末端序列及其克隆分析

邵泽香;韦强;崔言顺;*;鲍国连;*;刘燕;季权安

2009, 21(3): 0-229.

摘要 ( 891 )

PDF(315KB) ( 1355 )

利用3' RACE方法扩增并克隆了4株鸭肝炎病毒(DHV)(ZYM 株、Z05株、Z07株和Z10株)的基因组的3'末端真实序列，包括部分非结构蛋白(3D)基因以及紧接着3D基因下游的3 '端非编码区(untranslated region，UTR)和poly(A)尾巴。测序结果表明，扩增的特异性片段长度为597 nt(不包括polyA尾巴)。各毒株3'UTR 均为315 nt，位于终止密码子TGA之后，比对分析结果表明各毒株间的同源性较高；4株DHV 3 '末端核苷酸序列(不包括po]yA尾巴)之间的同源性为96．3％～100％，而与参考毒株之间的同源性为93．5％～99．7％。在系统发生进化树上，各毒株亲缘关系较近。

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彩色马蹄莲组培快繁体系优化

黄普乐;孙崇波;谢鸣

2009, 21(3): 0-237.

摘要 ( 1283 )

PDF(289KB) ( 1396 )

用0．1％的HgC12对彩色马蹄莲外植体进行常规灭菌，一年生种球的块茎芽灭菌时间12 min对于提高初代培养成活率的效果最好，二年生和三年生种球的块茎芽的最佳灭菌时间以16 min效果最好；在MS培养基上，BA 2．0+GA3 0．3激素配比组合可以比较稳定地诱导出较高5.3倍的增殖倍数，且不定芽生长良好，是最佳激素和浓度配比；采用1／2 MS培养基，IBA浓度为0．5 mg／L，蔗糖浓度为1O g／L时，壮苗生根的效果好；室外炼苗3 d有利于彩色马蹄莲组培苗瓶苗移栽成活，80 d后组培苗成活率达88％，试验过程中组培苗瓶苗在3月10 13移栽成活率最高，达到100％。

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温度对克氏原螯虾消化酶活性的影响

祝尧荣;寿建昕;沈文英*

2009, 21(3): 0-240.

摘要 ( 1411 )

PDF(204KB) ( 1344 )

分析了一定pH值下不同反应温度对克氏原螯虾3种主要消化酶活性的影响。结果表明：克氏原螯
虾淀粉酶在肝胰脏、肠道、胃的最适温度均为40℃ ；胃蛋白酶在肝胰脏、肠道、胃的最适温度都为35℃；脂肪酶在肝胰脏、肠道、胃的最适温度分别为25，35，25℃ ；胰蛋白酶在肝胰脏、肠道、胃的最适温度分别为55，65，55℃。在最适温度条件下，淀粉酶活性顺序为：胃>肝胰脏>肠；胰蛋白酶和胃蛋白酶活性顺序均为：肝胰脏>胃>肠道；脂肪酶在肝胰脏、肠道活性接近，大于胃内活性。

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石斛叶片蛋白质双向电泳技术体系的建立及优化

董婧;应奇才;王慧中*

2009, 21(3): 0-233.

摘要 ( 824 )

PDF(287KB) ( 1309 )

以石斛叶片为材料，建立了一套适用于石斛蛋白质组分析的双向电泳体系，探讨了石斛叶片蛋白的提取、蛋白定量以及双向电泳的一些关键技术。结果表明，通过三氯乙酸(TCA)法提取、高压等电聚焦和两步平衡等方法可以获得稳定、清晰的双向电泳图谱，获得了可分辨蛋白质斑点数约613个。

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干旱胁迫下长豇豆叶绿素荧光参数与品种耐旱性的关系

汪宝根;刘永华;吴晓花;鲁忠富;李国景*

2009, 21(3): 0-249.

摘要 ( 1343 )

PDF(282KB) ( 1566 )

研究了干旱胁迫对3个不同耐旱性长豇豆品种幼苗叶绿素荧光参数和光合作用的影响。结果表明：干旱胁迫降低豇豆的生长量和净光合速率，并增加叶片质膜的透性；干旱胁迫后叶片叶绿素荧光参数( Fv/Fm，φPSⅡ和qP)的变化与豇豆品种耐旱性相一致。认为叶绿素荧光参数测定方便，稳定性好，可作为长豇豆品种耐旱性鉴定的重要指标。

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铝胁迫下磷对荞麦根系和根边缘细胞抗性生理的影响

朱美红;吴韶辉;刘鹏;徐根娣;蔡妙珍*

2009, 21(3): 0-268.

摘要 ( 1486 )

PDF(338KB) ( 1378 )

以荞麦(Fagopyrum esculentum Moench)根系和根尖边缘细胞(border cell，BC)为材料，研究铝胁迫下磷对根系抗氧化酶活性和边缘细胞数目、活性的影响。结果表明，与200 μmol/L的单铝处理相比，3．0 mmol/L的供磷处理铝胁迫组的相对根长和根系蛋白质含量分别增长了22．8％和18．7％，根系超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性分别增加了20．8％和26．1％。1．5 mmol/L 的磷与铝共处理，边缘细胞的数目和活性分别比200 μmol/L的单铝处理增加了243．0％和187．0％。铝胁迫下供磷可有效促进根伸长和根系蛋白质的合成，提高SOD和POD活性，显著削弱铝毒对边缘细胞产生的抑制，减少细胞的死亡。说明供磷可有效增强荞麦根系的抗铝毒能力，提高根尖边缘细胞的数目和活性。

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不同植物生长调节剂对大豆光合及产量特性的影响

赵黎明;李建英;张志刚;项洪涛;郑殿峰

2009, 21(3): 0-258.

摘要 ( 873 )

PDF(254KB) ( 1530 )

在大田条件下，以垦农4号为材料，通过叶面喷施植物生长调节剂SODM，DTA-6和Cc，研究了不同植物生长调节剂对大豆叶片光合特性的影响。结果表明：在喷药后5～30 d，DTA-6提高了叶片的光合速率和蒸腾速率，并且显著的增加了大豆产量；而SODM则减缓了叶绿素含量的下降幅度。各处理及对照的水分效率和气孔导度的变化并没有直接的相关关系，其中气孔导度呈双峰曲线变化趋势，表现为各处理及对照在10d与20 d分别出现一高峰值。至喷药后30 d，各处理及对照的水分效率和气孔导度值变化规律一致，具体表现为：SODM>Cc>DTA一6>CK(对照)。表明叶面喷施DTA-6和SODM，调节了大豆叶片的光合特性，提高了大豆产量。

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不同薄膜处理对菠菜低温贮藏效果的影响

葛林梅;毛金林;陈杭君;郜海燕*

2009, 21(3): 0-277.

摘要 ( 932 )

PDF(269KB) ( 1367 )

用4种不同低密度聚乙烯(LDPE)薄膜(O．010，0．025，0．040和0．025 mm+防结露成分)包装菠菜，在低温(2 4-0．5)℃下进行贮藏试验。通过对贮藏过程菠菜理化指标和贮藏品质的定期测定及效果分析，结果表明：采用0．025 mm的含防结露成分的LDPE包装菠菜，能很好地保持菠菜的新鲜状态，不仅能降低呼吸强度、丙二醛含量和细胞膜透性，而且可控制叶片的叶绿素和可溶性蛋白含量下降，但各厚度薄膜包装对菠菜失水率影响相差不大。

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赤霉素引发处理提高烟草丸化种子活力和幼苗素质

马文广;郑昀晔;索文龙;宋碧清;牛永志

2009, 21(3): 0-298.

摘要 ( 1724 )

PDF(345KB) ( 1574 )

MS云烟87和MSK326烟草裸种经赤霉素(GA3)引发后，加工成丸化种。研究引发温度、时间和GA3浓度对25℃和10℃萌发条件下丸化种活力及幼苗素质的影响。结果表明，MS云烟87和MSK326裸种经100 mG／L GA3于25℃和20℃分别引发36 h后，丸化种在25℃下萌发，两烟草丸化种的发芽指数分别较对照提高18．58％和27．91％，活力指数提高30．58％和29．98％，平均发芽时间缩短0．69 d和0．85 d，MS云烟87的幼苗长增加0．23 cm，MSK326的幼苗干重增加0．29 g，引发效果较其他处理好。丸化种在低温10℃下萌发，100
mg／L的GA3于25℃下引发24 h处理对MS云烟87效果好，发芽指数提高18．05％，发芽时间缩短1．84 d；对于MSK326，50 mg／L GA3于20℃下引发24 h效果好，发芽指数提高14．58％，发芽时间缩短1．55 d。说明适宜的GA3引发处理可提高烟草丸化种子活力和幼苗素质，提高丸化种对低温的抗性。

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黑曲霉β一甘露聚糖酶的诱变选育及部分酶学特性

许少春;李艳丽;柳永;汤江武;许尧兴*

2009, 21(3): 0-273.

摘要 ( 1552 )

PDF(350KB) ( 1368 )

从实验室保藏的数十株真菌、细菌和酵母菌种中，经定向筛选，得到1株产β-甘露聚糖酶酶活较高的黑曲霉菌株MA。以菌株MA为出发菌，经Co60诱变和摇瓶发酵初、复筛，最终获得一株产 β-甘露聚糖酶活力高且遗传性能稳定的菌株MA-56，其所产的β-甘露聚糖酶活力稳定在9.31×l0 4 U／g，较出发菌株提高了64．78％。酶学性质初步研究表明，黑曲霉菌株MA-56所产甘露聚糖酶的最适反应温度为70℃，最适反应pH为2．5~3．5；该酶在70℃以下具有良好的热稳定性，在pH2．5～9．0的环境下表现稳定；在供试的10种金属离子中，只有Cu2+ 对酶活有较强的抑制作用。

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不同采收期草莓果实抗氧化物质含量和抗氧化活性的变化

张豫超;谢鸣;陈俊伟;徐红霞;张慧琴;蒋桂华*

2009, 21(3): 0-254.

摘要 ( 1373 )

PDF(306KB) ( 1657 )

以“章姬”和“0362”为试材，研究不同时期采收的草莓果实抗氧化物质含量(总酚、总黄酮)和抗氧化活性(DPPH，TEAC和FRAP值)的动态变化结果表明，在试验期内，随采收时期的推移，章姬、0362红熟期果实抗氧化物质含量和抗氧化活性均呈上升趋势；抗氧化物质含量和抗氧化活性在两品种间存在差异。统计分析表明，草莓果实的总酚和总黄酮含量与抗氧化活性之间存在明显的线性正相关，总酚与DPPH，TEAC和FRAP的相关系数分别为0.8228，0.8812，0.8419。因此，不同时期采收的草莓果实的抗氧化活性的变化与果实酚类物质含量的变化有关。

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基于计算机视觉的自然光照条件下成熟石榴的识别

姜莉;沈明霞 *;王学林

2009, 21(3): 0-282.

摘要 ( 859 )

PDF(306KB) ( 1354 )

研究自然光照条件下成熟石榴识别；利用同态滤波进行图像增强，将图像从RGB空间转换到HSI空间，并将色调和饱和度融合，有效去除暗背景和灰背景，利用区域面积并结合形态学特征去噪实现区域分割，最后利用优化后的Hough变换提取形心和半径，恢复遮挡果形；基于VC++6.0开发图像处理程序，能够实现对成熟石榴的识别；识别率为85％以上，为下一步对目标正确定位，实现水果采摘自动化收获打下基础。

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嫁接防治番茄青枯病的研究

王汉荣;*;茹水江;王连平;方丽;任海英;冯忠民

2009, 21(3): 0-287.

摘要 ( 1855 )

PDF(329KB) ( 2494 )

分别进行了4个番茄砧木品种ZJ-1，ZJ-3，ZJ-7，ZJ-9对番茄青枯病的抗性，与番茄接穗品种浙杂203亲和性及其嫁接苗对番茄青枯病抗性的测定。结果表明，zJ-1和zJ-9是防治番茄青枯病的最佳抗病砧木，且它们与接穗品种浙杂203的嫁接亲和力强，其嫁接成活率都超过99％；分别接种3个不同小种的番茄青枯病菌，以ZJ-1和7,1-9为砧木的浙杂203嫁接苗的平均成活率分别为97．4％和97．8％，与浙杂203非嫁接苗的平均成活率(为75．0％)差异极显著。经田问对嫁接苗的长势、产量和品质测定，以ZJ-1，ZJ-9为砧木的浙杂203嫁接苗的青枯病病株率均小于5．0％，大大低于对照植株浙杂203的发病率21．4％，比不嫁接的浙杂203分别增产92．2％和101．7％。且嫁接苗的生长势强，对果实的品质无影响。

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水稻氮素及钾素叶位分布特点及诊断叶位研究

郭彬;林义成;丁能飞;傅庆林 *;刘琛

2009, 21(3): 0-302.

摘要 ( 935 )

PDF(256KB) ( 1421 )

利用盆栽试验研究水稻拔节期、孕穗期不同叶位氮素及钾素时空分布特征，并进行了不同叶位含氮、钾量与总叶片含氮、钾量以及施氮、钾量的线性相关分析。结果表明，拔节期叶位间含氮量由上而下逐级增加，孕穗期叶位间含氮量由上而下逐级递减，两个时期内叶位间含钾量均表现为由上而下逐级递减。增施氮能减少叶位间氮素的差异，但增施钾叶位间含钾量的差异无显著变化。相关分析表明，拔节期水稻顶1叶适合作为氮营养的诊断叶片，孕穗期水稻顶3叶或顶4叶适合作为氮营养的诊断叶片，顶1叶适合作为拔节期、孕穗期钾营养的诊断叶片。

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响应面法优化菜粕固态发酵工艺的研究

孙宏;汤江武;葛向阳;*;

2009, 21(3): 0-306.

摘要 ( 1306 )

PDF(199KB) ( 1495 )

采用响应面分析法对影响固态发酵菜粕中粗蛋白含量的4个主要因素(料水比、温度、棉粕添加量和发酵时间)进行了研究，考察了各因素及其交互作用对发酵菜粕粗蛋白含量的影响。结果表明，最佳的菜粕固态发酵工艺参数分别为：发酵温度30．1 ℃，料水比1：0．8，棉粕添加量为10．1％，发酵时间为46．9 h，发酵菜粕的粗蛋白含量达到最大值41．70％，比工艺优化前提高了15．8％。

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绿色荧光蛋白基因标记枯草芽孢杆菌研究

沈卫锋;牛宝龙;翁宏飚;刘岩;何丽华;孟智启*

2009, 21(3): 0-206.

摘要 ( 1421 )

PDF(272KB) ( 1427 )

将源于枯草芽孢杆菌168的木糖启动子xylR和来源于载体pGFPuv的基因连接，插入枯草芽孢杆
菌一大肠杆菌穿梭载体pIM，成功构建了以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组载体pIM-GFP。转化枯草芽孢杆菌菌株BS523，突变株在荧光显微镜及紫外灯下均观察到较强的绿色荧光，同时PCR鉴定结果正确。表明重组载体pIM-GFP成功转入菌株BS523，并且gfp 基因成功表达。

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温郁金遗传多样性的ISSR分析

陶正明;冷春鸿;吴志刚;李林

2009, 21(3): 0-210.

摘要 ( 1441 )

PDF(213KB) ( 1533 )

应用ISSR标记技术对温郁金6个居群的样品进行遗传多样性分析，11条引物共扩增得到82条带，其中多态性带26条，占总扩增带的31．7％。利用NTSYS-pc(Version 2．10e)软件分析供试样品问的遗传相似系数，利用POPGENE 1．32计算各居群间的遗传一致度和遗传距离，并用MEGA 3．1软件得到各居群间的聚类树状图。结果表明，供试6个温郁金居群间多态性不丰富，遗传多样性水平较低。

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侵染水仙的虎眼万年青花叶病毒外壳蛋白的原核表达、抗血清制备及应用

郑红英;鲁宇文;沈嘉乐;林林;陈炯;陈剑平*

2009, 21(3): 0-201.

摘要 ( 1449 )

PDF(257KB) ( 1463 )

采用特异性表达引物PCR扩增了一个从英国围裙水仙样品上分离的虎眼万年青花叶病毒外壳蛋白
基因序列。构建原核表达载体，制备了OrMV分离物的外壳蛋白抗血清。对制备的抗血清进行了Western-blot检测，血清学关系研究并应用于样品的间接ELISA检测。

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浙江省农业技术进步贡献率实证研究

张社梅

2009, 21(3): 0-193.

摘要 ( 918 )

PDF(289KB) ( 1542 )

利用1990--2005年浙江省l1个地市的平行数据(Panel Data)，在综合考虑偏要素技术进步和中性技术进步的共同作用下，应用超越对数函数法建立了浙江省农业技术进步测算模型。测算结果表明：浙江省农业发展已经进入内涵式扩大再生产阶段，今后促进农业劳动力、土地等要素的技术进步以及完善农业发展的市场导向机制是提高浙江省农业技术进步的关键所在。

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改进模糊聚类算法在浙江旱栽优势作物核心种质研究中的应用

李笑;徐志福;朱丹华

2009, 21(3): 0-197.

摘要 ( 834 )

PDF(266KB) ( 1277 )

模糊聚类分析已被广泛应用在气象预报、地质、模式识别、数据挖掘等方面。文章将模糊聚类分析应用于作物核心种质构建过程中，并对传统的模糊聚类算法进行了改进，在相似系数和距离系数的基础上，提出了一种既能考虑到样本之间的值贴近程度，又能考虑到样本之间的形贴近程度的改进系数——相似度，用相似度矩阵替代传统的相似矩阵，使模糊聚类分析模型能够更符合构建作物核心种质的需要。

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